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2025-12-18 13:52   2508次瀏覽
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電泳基本原理:生物大分子如蛋白質,核酸,多糖等大多都有陽離子和陰離子基團,稱為兩性離子。常以顆粒分散在溶液中,它們的靜電荷取決于介質的H+濃度或與其他大分子的相互作用。在電場中,帶電顆粒向陰極或陽極遷移,遷移的方向取決于它們帶電的符號,這種遷移現象即所謂電泳。

等速電泳 是在樣品中加有離子(其遷移率比所有被分離離子的大)和終末離子(其遷移率比所有被分離離子的小),樣品加在離子和終末離子之間,在外電場作用下,各離子進行移動,經過一段時間電泳后,達到完全分離。被分離的各離子的區帶按遷移率大小依序排列在離子與終末離子的區帶之間。由于沒有加入適當的支持電解質來載帶電流,所得到的區帶是相互連接的(圖d),且因“自身校正”效應,界面是清晰的,這是與區帶電泳不同之處。

等電聚焦電泳 是將兩性電解質加入盛有pH梯度緩沖液的電泳槽中,當其處在低于其本身等電點的環境中則帶正電荷,向負極移動;若其處在高于其本身等電點的環境中,則帶負電向正極移動。當泳動到其自身特有的等電點時,其凈電荷為零,泳動速度下降到零,具有不同等電點的物質后聚焦在各自等電點位置,形成一個個清晰的區帶,分辨率。

電泳已日益廣泛地應用于分析化學、生物化學、臨床化學、毒劑學、藥理學、免疫學、微生物學、食品化學等各個領域。在直流電場中,帶電粒子向帶符號相反的電極移動的現象稱為電泳(electropho-resis)。1807年,由俄國莫斯科大學的斐迪南·弗雷德里克·羅伊斯(Ferdinand Frederic Reuss)首先發現了電泳現象,但直到1937年瑞典的Tiselius建立了分離蛋白質的界面電泳(boundary electrophoresis)之后,電泳技術才開始應用。上世紀60-70年代,當濾紙、聚丙烯酰胺凝膠等介質相繼引入電泳以來,電泳技術得以迅速發展。豐富多彩的電泳形式使其應用十分廣泛。電泳技術除了用于小分子物質的分離分析外,主要用于蛋白質、核酸、酶,甚至病毒與細胞的研究。由于某些電泳法設備簡單,操作方便,具有高分辨率及選擇性特點,已成為醫學檢驗中常用的技術。

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